高压细胞破碎仪厂家述细胞破碎的实验室方法

　　高压细胞破碎仪厂家讲述随着重组DNA技术得到广泛应用以来，生物技术发生了质的飞跃。很多基固工程产物都是胞内物质，必须将细胞破壁。使产物得以释放。才能进一步提取，因此细胞破碎是提取胞内产物的关键步骤。破碎方法的得当与否，直接影响到所提取产品的产量、质量和生产成本。
　　细胞破碎的实验室方法可通过酶解法来实现，高压细胞破碎仪厂家与您一起来探讨：
　　酶解法利用不同水解酶，如溶菌酶、纤维素酶、蜗牛酶和酯酶等，于37℃，pH8，处理15分钟，可以专一性地将细胞壁分解，释放出细胞内含物，此法适用于多种微生物。例如从某些细菌细胞提取质粒DNA时，可采用溶菌酶（来自蛋清）破细胞壁，而在破酵母细胞时，常采用蜗牛酶（来自蜗牛），将酵母细胞悬于0.1mmol/L柠檬酸一磷酸氢二钠缓冲液(pH=5.4)中，加1％蜗牛酶，在30℃处理30分钟，即可使大部分细胞壁破裂，如同时加入0.2％疏基乙醇效果会更好。此法可以与研磨法联合使用。
　　细胞培养和收集：将活化酵母菌株接入马铃薯培养基中，于30℃摇床培养。在对数生长期离心收集细胞，制成湿菌体。
　　细胞的破碎：
　　1.取5ml菌液悬液于10ml的1号试管中，再取1%的蜗牛酶于2号试管中。再取0.2%的疏基乙醇于3号试管中。
　　2.将三支都放入30℃的水浴中，预热30s后，将装有蜗牛酶的2号试管和装有疏基乙醇的3号试管均倒入盛有菌液的试管中，在水浴中处理30分钟。
　　3.取一滴菌液镜检。取5个视野数出破碎细胞的个数并算出平均值。对比各种方法的破碎细胞数量。